Clinica Chimica Acta刊文： 一種新型非侵入的BK病毒相關性腎病檢測技術

近日，奧根診斷（AlloDx Biotech）聯(lián)合江蘇大學、華中科技大學醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院等機構(gòu)在國際臨床化學與檢驗醫(yī)學協(xié)會（IFCC）官方雜志 Clinica Chimica Acta (CCA) 上，發(fā)表了一項關于BK病毒相關性腎?。˙KPyVAN）檢測領域的重要研究成果“Diagnostic value of three urine miRNAs composite score in BK virus nephropathy”。該研究成果基于尿液miRNA檢測技術，成功開發(fā)全球首個“PymiR Score”評分系統(tǒng)，是一種新型、非侵入型的BKPyVAN的檢測平臺。

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目前，臨床主要通過血尿BK病毒拷貝數(shù)（BKV-DNA）和腎活檢SV40免疫組化來評估BKV的感染程度。但前者只是評估BKV在體內(nèi)的負荷/載量，并不能反映其代謝活躍程度及對腎臟的損傷情況，因此很難用統(tǒng)一的DNA拷貝數(shù)來指導臨床治療；而腎活檢無法作為臨床常規(guī)檢測手段，另外SV40染色提示的是BKV相關蛋白的表達，是BKV利用其DNA遺傳信息，最終形成的具有特定功能蛋白質(zhì)的結(jié)果；其它一些檢測技術，例如Decoy細胞、ddcfDNA等反映的是BKV造成腎損傷的程度，當檢測值升高時，提示BKV已經(jīng)造成了腎損傷。

那么，是否有一種介于BKV-DNA拷貝數(shù)與腎損傷過程之間，又可以無創(chuàng)診斷BKV感染程度的標志物？

圖1. BK病毒在腎臟中的生物學過程。根據(jù)生物中心法則，RNA是由BKV-DNA轉(zhuǎn)錄而來、經(jīng)翻譯成為蛋白質(zhì)，RNA能夠反映BKV轉(zhuǎn)錄水平的活躍程度。

奧根診斷研發(fā)團隊另辟蹊徑，聚焦尿液中的三種關鍵生物標志物——BK病毒特異性miRNA（bkv-miR-B1-5p、bkv-miR-B1-3p）及腎損傷標志miRNA（miR-21-5p），在RNA表達水平（圖1），通過創(chuàng)新性算法整合三者表達水平，構(gòu)建出“PymiR Score”評分模型。

**高穩(wěn)定性和可重復性：**定量范圍5.7*105-5.7*1010copies/μL，最低檢出限2*103copies/mL，組內(nèi)和組間Ct值的變異系數(shù)分別為2.13%-3.59%和2.30%-3.35%。（圖2）

圖2

**檢測特異性強：**不受其它諸如JC多瘤病毒（JCV）、細小病毒（B19）、巨細胞病毒（CMV）及愛潑斯坦-巴爾病毒等感染的影響。（圖3）

圖3

**PymiR Score評分模型：**當臨界值≥71.78時達到最大值，證實了該模型在驗證集中的區(qū)分能力。（圖4，其中Ct1、Ct2和Ct3分別是qPCR中bkv-miR-B1-5p、bkv-miR-B1-3p和miR-21-5p的Ct值。）

圖4

**精準度躍升：**臨床驗證顯示，PymiR Score區(qū)分BK病毒感染與腎病的曲線下面積（AUC）達0.87，靈敏度76.9%、特異性100%，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)血漿病毒DNA檢測（AUC=0.73）。（圖5）

圖5

奧根診斷研發(fā)團隊的這項研究，是全球首次同時檢測腎移植受者尿液中多個miRNAs水平，并建立了BKPyVAN風險模型，即PymiR Score綜合風險評分模型。同時初步驗證了該模型在鑒別BKV感染和BKPyVAN患者方面的準確度。該研究成果在2024年6月的美國器官移植大會（ATC2024）上，也受邀進行了展示，其進一步的臨床意義還需要有更多的臨床研究設計來發(fā)掘和驗證。

結(jié)語
奧根診斷以“科技守護生命”為使命，此次研究成果彰顯了公司在國際器官移植檢測領域的創(chuàng)新能力。未來，隨著PymiR Score的廣泛應用，無數(shù)腎移植患者將受益于這一“無創(chuàng)、精準、高效”的檢測新方案。