科學(xué)家培育出“迷你大腦”，最終會(huì)產(chǎn)生意識(shí)嗎？

科學(xué)家正在培養(yǎng)皿中培育“迷你大腦”（也稱(chēng)腦類(lèi)器官），希望通過(guò)這些大腦神經(jīng)細(xì)胞集群來(lái)模擬部分大腦功能，并加深和改變我們對(duì)大腦神經(jīng)發(fā)育和疾病的理解。

他們努力使它們變得更像人腦，近幾年的進(jìn)展尤其快，更是發(fā)現(xiàn)了一些令人驚訝的現(xiàn)象，如體外生長(zhǎng)的神經(jīng)元會(huì)自發(fā)激發(fā)，這是神經(jīng)元在人腦中生長(zhǎng)和建立新連接的方式之一；在腦類(lèi)器官中觀(guān)察到類(lèi)似于早產(chǎn)兒腦中出現(xiàn)的活動(dòng)腦波，這種全腦協(xié)調(diào)性電活動(dòng)是大腦有意識(shí)的特征之一等。

因此，一個(gè)問(wèn)題變得緊迫，就是這些腦類(lèi)器官會(huì)最終產(chǎn)生意識(shí)嗎？科學(xué)家在尋找答案。

撰文 | 小葉

上世紀(jì)80年代，美國(guó)哲學(xué)家希拉里·普特南提出了著名的“缸中之腦”思想實(shí)驗(yàn)。而過(guò)了不到半世紀(jì)的時(shí)間，生物學(xué)家們已經(jīng)能在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)皿中培育出了現(xiàn)實(shí)版的“缸中迷你大腦”——腦類(lèi)器官（brain organoids）。

雖然這是只有幾毫米寬的大腦神經(jīng)細(xì)胞集群，但已能模擬部分大腦功能。并且，我們很快迎來(lái)了一個(gè)重要問(wèn)題：這樣的腦類(lèi)器官會(huì)產(chǎn)生意識(shí)嗎？

腦類(lèi)器官研究進(jìn)展迅速

類(lèi)器官（organoid）也稱(chēng)作微器官（mini-organ），顧名思義，即類(lèi)似于真實(shí)器官的微型模型，通過(guò)對(duì)多能干細(xì)胞或者成體細(xì)胞進(jìn)行體外三維培養(yǎng)，自組織形成，與人體器官結(jié)構(gòu)高度相似，并能復(fù)現(xiàn)被模仿器官的部分功能。

類(lèi)器官的起源最早可追溯回1907年，美國(guó)北卡羅來(lái)納大學(xué)的動(dòng)物學(xué)教授H. V. Wilson發(fā)表論文[1]，揭示了通過(guò)機(jī)械分離的海綿細(xì)胞可以重新聚集，并自組織成同樣具有正常生命功能的全新海綿。

到了20世紀(jì)50年代，其他科學(xué)家紛紛利用其他動(dòng)物細(xì)胞展開(kāi)相同的實(shí)驗(yàn)，表明脊椎動(dòng)物細(xì)胞都擁有自組織能力，由此奠定了日后類(lèi)器官培育技術(shù)不可或缺的重要特征：自組織能力，就好像給細(xì)胞上了發(fā)條，只要提供合適的培養(yǎng)環(huán)境，細(xì)胞們各司其職，自組織形成類(lèi)器官[2]。

而干細(xì)胞技術(shù)，則是類(lèi)器官得以蓬勃發(fā)展的另一關(guān)鍵。上世紀(jì)80年代，前蘇聯(lián)科學(xué)家A. J. Friedenstein團(tuán)隊(duì)展開(kāi)一系列前沿實(shí)驗(yàn)，在骨髓中發(fā)現(xiàn)了一種成骨干細(xì)胞[3]或骨髓基質(zhì)干細(xì)胞[4]，可通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)生成多種骨骼組織[5]。到了90年代，美國(guó)凱斯西儲(chǔ)大學(xué)生物學(xué)教授Arnold Caplan將其重命名為間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal Stem Cell, MSC）[6]，最終這一稱(chēng)呼為學(xué)界普遍接受。MSC被證實(shí)[7]是一種具有自我更新和多向分化能力的多潛能干細(xì)胞，可轉(zhuǎn)化成各種細(xì)胞類(lèi)型，具有廣泛的臨床應(yīng)用價(jià)值。

同樣在80年代，美國(guó)威斯康星大學(xué)麥迪遜分校的發(fā)育生物學(xué)家James Thomson教授也長(zhǎng)期潛心于這一領(lǐng)域，探索靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物身上干細(xì)胞的潛能。直到1998年，他使用捐贈(zèng)的人類(lèi)胚胎，構(gòu)建出世界上首份人類(lèi)胚胎干細(xì)胞系[8]。2007年，他與日本京都大學(xué)的山中伸彌團(tuán)隊(duì)合作，成功將人類(lèi)成體細(xì)胞誘導(dǎo)成多能性干細(xì)胞（iPSC）[9]。iPSC細(xì)胞在體外擁有無(wú)限增殖的潛能，不僅能夠表達(dá)胚胎干細(xì)胞中的干細(xì)胞標(biāo)志物，還具有分化為三個(gè)胚層細(xì)胞或組織的潛力[10]。

至此萬(wàn)事俱備，自組織特性與干細(xì)胞領(lǐng)域的飛速發(fā)展為類(lèi)器官研究注入全新活力，21世紀(jì)最初的十多年迎來(lái)百花齊放的成果展示：肝類(lèi)器官[11]、腸類(lèi)器官[12]、視網(wǎng)膜、前列腺、肺、腎、乳腺、腦類(lèi)器官等紛紛成功培育而出，類(lèi)器官以其迅猛的態(tài)勢(shì)成為了熱點(diǎn)研究。2013年，類(lèi)器官被《科學(xué)》（Science）期刊評(píng)為年度十大技術(shù)[13]。又10年后，《麻省理工科技評(píng)論》在2023年“全球十大突破性技術(shù)”預(yù)測(cè)中，預(yù)言隨著研究人員探索如何從頭開(kāi)始設(shè)計(jì)復(fù)雜組織，在工廠(chǎng)里培育定制器官，工程化器官制造技術(shù)將在未來(lái)10-15年走向成熟。

在眾多類(lèi)器官中，腦類(lèi)器官是尤為濃墨重彩的一章。數(shù)百年來(lái)，解開(kāi)人類(lèi)大腦發(fā)育和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的奧秘一直是腦科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重大挑戰(zhàn)，學(xué)界付出了各種努力，不僅建立了各種體內(nèi)外細(xì)胞以及動(dòng)物模型，還嘗試?yán)枚S方法培養(yǎng)人腦神經(jīng)元來(lái)解析相關(guān)疾病發(fā)生機(jī)制。然而，對(duì)于動(dòng)物模型，由于物種差異，實(shí)驗(yàn)室的模式動(dòng)物大腦模型無(wú)法完全真實(shí)模擬人類(lèi)大腦的復(fù)雜性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能并不完全適用于人類(lèi)大腦。培養(yǎng)皿中生長(zhǎng)出來(lái)的二維神經(jīng)元，其空間結(jié)構(gòu)、細(xì)胞類(lèi)型復(fù)雜程度、互作以及微環(huán)境等，也與三維人腦相差甚遠(yuǎn)[14]。

腦類(lèi)器官恰好彌補(bǔ)了上述缺陷。2008年，日本干細(xì)胞生物學(xué)家笹井芳樹(shù)（Yoshiki Sasai）團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)[15]，來(lái)源于干細(xì)胞自發(fā)組織的神經(jīng)球中可以產(chǎn)生皮層樣結(jié)構(gòu)，包含有皮層祖細(xì)胞和功能神經(jīng)元，這便是首個(gè)初級(jí)腦類(lèi)器官模型。2013年，奧地利科學(xué)院分子生物技術(shù)研究所的Jürgen Knoblich和英國(guó)劍橋大學(xué)發(fā)育生物學(xué)家Madeline Lancaster 在《自然》（Nature）發(fā)表論文文[16]，報(bào)告了首個(gè)人類(lèi)多能干細(xì)胞衍生的三維腦類(lèi)器官，團(tuán)隊(duì)利用生物凝膠matrigel來(lái)模擬大腦周?chē)M織，并使用旋轉(zhuǎn)生物反應(yīng)器來(lái)幫助營(yíng)養(yǎng)的吸收和氧氣擴(kuò)散，在這樣持續(xù)的三維懸浮培養(yǎng)中添加促進(jìn)神經(jīng)發(fā)育的生長(zhǎng)因子，最終獲得了進(jìn)一步完善的腦類(lèi)器官培養(yǎng)物，它包含類(lèi)似于前腦、脈絡(luò)叢、海馬、前額葉等多個(gè)獨(dú)立又相互依賴(lài)的腦區(qū)結(jié)構(gòu)。

隨后，世界各地的科學(xué)家不斷摸索各種具有腦區(qū)特異性的腦類(lèi)器官，他們組合不同小分子和生長(zhǎng)因子，成功得到了包括中腦、丘腦、小腦、紋狀體等腦類(lèi)器官。還有的科學(xué)家嘗試將兩個(gè)甚至多個(gè)腦區(qū)類(lèi)器官組裝起來(lái)，形成“類(lèi)組裝體”（assembloids），進(jìn)一步模擬真實(shí)情況下人類(lèi)大腦發(fā)育、神經(jīng)元遷移等過(guò)程。例如，2019年一篇發(fā)表在《細(xì)胞干細(xì)胞》（Cell Stem Cell）期刊上的論文[17]將丘腦類(lèi)器官與皮層類(lèi)器官融合，以模擬丘腦-皮層之間的神經(jīng)元雙向投射過(guò)程。除了多個(gè)腦區(qū)組裝，也有研究[18]將腦類(lèi)器官與肌肉組織等非神經(jīng)類(lèi)器官組裝起來(lái)，觀(guān)察神經(jīng)對(duì)其他組織的支配作用，得到了與真實(shí)人體內(nèi)相似的結(jié)果。

腦類(lèi)器官技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)易圖，來(lái)源：10.1038/s41392-022-01024-9[19]

與真實(shí)大腦的差異

實(shí)際上，腦類(lèi)器官只有幾毫米寬，是一團(tuán)類(lèi)似于大腦的細(xì)胞集群。它作為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)出來(lái)的迷你模型，卻擁有其他大腦研究方式所不具備的優(yōu)勢(shì)。例如，當(dāng)將電極與腦類(lèi)器官連接起來(lái)時(shí)，能觸發(fā)神經(jīng)元之間的信號(hào)傳遞，自發(fā)模仿真實(shí)大腦。

那么，腦類(lèi)器官就是微縮版的真實(shí)大腦了嗎？實(shí)際情況并非如此，目前的腦類(lèi)器官并不完全匹配真實(shí)大腦。

首先，腦類(lèi)器官最顯著的缺陷是它們長(zhǎng)到幾毫米之后就會(huì)停止生長(zhǎng)，原因是沒(méi)有提供氧氣和營(yíng)養(yǎng)的血管。不同于自然生物組織，腦類(lèi)器官的生長(zhǎng)依賴(lài)于滲透入培養(yǎng)皿內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)液，長(zhǎng)到一定大小后，一旦營(yíng)養(yǎng)不夠，生長(zhǎng)就停止了，并且從中心部位細(xì)胞開(kāi)始死亡，早在長(zhǎng)到像真正大腦那樣之前就不幸夭折了。因此，各團(tuán)隊(duì)想方設(shè)法，或在腦類(lèi)器官中生長(zhǎng)出血管，或培養(yǎng)血管化類(lèi)器官并將其與腦類(lèi)器官融合，或人為在腦類(lèi)器官中打開(kāi)通道，讓更多營(yíng)養(yǎng)液灌注入其中，產(chǎn)生更多成熟的神經(jīng)突觸[20]。

其次，不同于真實(shí)大腦，腦類(lèi)器官缺少來(lái)自周?chē)h(huán)境的感知輸入，而感知輸入是大腦回路發(fā)育不可或缺的關(guān)鍵之一。腦類(lèi)器官?zèng)]有眼睛去看，沒(méi)有耳朵去聽(tīng)，沒(méi)有鼻子去辨別氣味，更沒(méi)有嘴巴去品嘗味道。孤立于培養(yǎng)皿中的腦類(lèi)器官，在沒(méi)有感知輸入的情況下，無(wú)法自主編碼經(jīng)驗(yàn)和信息。[21]

2020年發(fā)表在《自然》期刊上的論文提出了一個(gè)相對(duì)克制的觀(guān)點(diǎn)[22]，表示目前廣泛使用的腦類(lèi)器官模型尚無(wú)法復(fù)制真正大腦發(fā)育和組織的基本特征，更不用說(shuō)模擬復(fù)雜腦部疾病和正常認(rèn)知所需的復(fù)雜腦回路。研究人員發(fā)現(xiàn)其背后的一個(gè)原因是，類(lèi)器官細(xì)胞的“身份危機(jī)”：腦類(lèi)器官細(xì)胞無(wú)法正常分化成獨(dú)特的細(xì)胞亞型，在類(lèi)型完全不同的細(xì)胞中能夠發(fā)現(xiàn)各種基因“大雜燴”，讓發(fā)育程序陷入混亂。另一個(gè)原因則是實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)方式導(dǎo)致細(xì)胞“壓力山大”：所有腦類(lèi)器官模型都表達(dá)了異常高水平的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)基因，導(dǎo)致細(xì)胞行為異常，生成異常蛋白，最終導(dǎo)致類(lèi)器官細(xì)胞無(wú)法正常發(fā)育[23, 24]。

真實(shí)大腦的發(fā)育過(guò)程好比交響樂(lè)，各種樂(lè)器同時(shí)演奏，在指揮的協(xié)調(diào)下相互配合，演繹出優(yōu)美和諧的復(fù)雜樂(lè)章。而腦類(lèi)器官要達(dá)到這樣復(fù)雜的程度，類(lèi)器官科學(xué)家們才剛剛邁出了第一步。

腦類(lèi)器官會(huì)產(chǎn)生意識(shí)嗎？

盡管腦類(lèi)器官距離真實(shí)大腦還很遙遠(yuǎn)，但這不妨礙科學(xué)家超前思索一個(gè)問(wèn)題：“培養(yǎng)皿中的類(lèi)大腦”會(huì)最終產(chǎn)生意識(shí)嗎？

根據(jù)目前的研究形勢(shì)，大多數(shù)腦類(lèi)器官科學(xué)家都認(rèn)為腦類(lèi)器官不會(huì)、也不能發(fā)展出意識(shí)形式。

首位培育出腦類(lèi)器官的 Lancaster認(rèn)為，目前的腦類(lèi)器官仍然太原始，無(wú)法產(chǎn)生意識(shí)，它們?nèi)狈?chuàng)造復(fù)雜腦電圖模式所必須的解剖結(jié)構(gòu)。盡管腦類(lèi)器官“在沒(méi)有輸入和輸出的情況下，其中的神經(jīng)元可能彼此交流溝通，但這并不一定意味著任何類(lèi)似人類(lèi)思想意識(shí)的狀態(tài)。”[25]在Lancaster與大多數(shù)科研人員看來(lái)，讓死亡的豬腦“恢復(fù)活力”反而比腦類(lèi)器官更有可能產(chǎn)生意識(shí)。

今年6月，加州大學(xué)圣芭芭拉分校的神經(jīng)科學(xué)家Kenneth Kosik在《模式》（Patterns）期刊上發(fā)表了一篇觀(guān)點(diǎn)性文章[26]，提出腦類(lèi)器官研究最終有可能在實(shí)驗(yàn)室中創(chuàng)造出意識(shí)，但根據(jù)目前技術(shù)甚至不久將來(lái)的技術(shù)條件，這種可能性并不存在。

首先，正如前文所述，盡管腦類(lèi)器官不容忽視的缺陷表明，它們尚不符合意識(shí)的任何操作性定義，科學(xué)家要克服這些缺陷仍有很多障礙需要克服?，F(xiàn)在討論類(lèi)器官會(huì)不會(huì)產(chǎn)生意識(shí)，仍為時(shí)尚早。

其次，對(duì)于“什么是意識(shí)”這問(wèn)題，千百年來(lái)哲學(xué)家和科學(xué)家們都在不斷探索，理論五花八門(mén)，至今仍缺乏大家普遍認(rèn)可的定義?，F(xiàn)代科學(xué)將意識(shí)劃入科學(xué)問(wèn)題的范疇，從神經(jīng)機(jī)制的角度來(lái)解釋?zhuān)煞譃樗念?lèi)理論：高階理論（HOT），全局神經(jīng)工作空間理論（GNWT）、整合信息理論（IIT）以及再入和預(yù)處理理論。這些理論不僅圍繞大腦探討意識(shí)問(wèn)題，還強(qiáng)調(diào)了主體身體與環(huán)境之間相互作用的重要性，影響著意識(shí)產(chǎn)生所要求的各種能力：表征、感官、感知等等。而腦類(lèi)器官最明顯的特征之一，恰恰是它完全脫離身體，無(wú)論是運(yùn)動(dòng)還是感知，沒(méi)有任何軀體經(jīng)驗(yàn)歷史。雖然已有實(shí)驗(yàn)表明腦類(lèi)器官的神經(jīng)放電活動(dòng)類(lèi)似于大腦編碼經(jīng)驗(yàn)相關(guān)的模式，但仍然存在一個(gè)問(wèn)題：一個(gè)能夠編碼經(jīng)驗(yàn)但沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)歷史的框架（腦類(lèi)器官）能否產(chǎn)生意識(shí)？沒(méi)有內(nèi)容，意識(shí)會(huì)存在嗎？

早在2022年，Kosik在Nautilus雜志上發(fā)表的長(zhǎng)文[27]就提出，腦類(lèi)器官?zèng)]有意識(shí)的重要原因就是它們并不擁有核心性質(zhì)——抽象提取能力。意識(shí)需要抽象過(guò)程，而這一過(guò)程基于我們對(duì)感官世界的印象和運(yùn)動(dòng)反饋之間的相關(guān)性。當(dāng)我們看到餐桌上的紅色蘋(píng)果，就會(huì)觸發(fā)如下過(guò)程：物體反射的光激活了視網(wǎng)膜中的光感受器，向大腦傳送了一個(gè)信號(hào)；信號(hào)中包含著豐富的關(guān)于物體顏色、大小和環(huán)境等信息。經(jīng)過(guò)世間多年生活經(jīng)驗(yàn)，與單詞“紅色”和“蘋(píng)果”這兩個(gè)概念對(duì)應(yīng)的放電模式已產(chǎn)生，最終我們“意識(shí)”到桌上放的是紅蘋(píng)果。而腦類(lèi)器官的神經(jīng)放電活動(dòng)卻不與任何現(xiàn)實(shí)中的東西相關(guān)聯(lián)。

當(dāng)然，也有科學(xué)家持肯定意見(jiàn)，英國(guó)蘇塞克斯大學(xué)認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)家Anil Seth在一次《自然》播客[28]中表示，自己并不排除腦類(lèi)器官產(chǎn)生意識(shí)的可能性，隨著腦類(lèi)器官的復(fù)雜性和與人類(lèi)大腦相似性的不斷提升，即便結(jié)構(gòu)不完全等同于人腦，它們也完全有可能擁有意識(shí)體驗(yàn)。

盡管持否定觀(guān)點(diǎn)的科學(xué)家居多，但一些有趣的實(shí)驗(yàn)表明，產(chǎn)生意識(shí)的基本要素可能已經(jīng)逐漸顯現(xiàn)。

在加州大學(xué)圣地亞哥分校神經(jīng)科學(xué)家Alysson Muotri的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，陳列著數(shù)百個(gè)培養(yǎng)皿——里面漂浮著芝麻大小的腦類(lèi)器官。他用各種不同尋常的方法來(lái)操控腦類(lèi)器官，其中一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)成果引起了廣泛關(guān)注。2019年，Moutri團(tuán)隊(duì)在《細(xì)胞干細(xì)胞》上發(fā)表的論文[29]報(bào)告創(chuàng)造出能產(chǎn)生協(xié)調(diào)活動(dòng)波的腦類(lèi)器官，類(lèi)似于早產(chǎn)兒腦中看到的活動(dòng)腦波。這種全腦協(xié)調(diào)性電活動(dòng)是大腦有意識(shí)的特征之一，因此團(tuán)隊(duì)認(rèn)為腦類(lèi)器官基本上模擬了人類(lèi)大腦初期的發(fā)育過(guò)程。然而，對(duì)于該結(jié)果也有質(zhì)疑，主要在于類(lèi)似早產(chǎn)兒的腦電波并不意味著可以將腦類(lèi)器官與嬰兒大腦劃等號(hào)。而且嬰兒的腦電波與成人不同，往往呈現(xiàn)出非常雜亂、無(wú)規(guī)律的波動(dòng)。

Muotri實(shí)驗(yàn)室中的一盤(pán)腦類(lèi)器官，來(lái)源：David Poller/ZUMA Wire, via Alamy Live News

同年，京都大學(xué)的坂口秀哉 （Hideya Sakaguchi）團(tuán)隊(duì)在《干細(xì)胞報(bào)告》期刊上報(bào)告[30]，成功將皮質(zhì)球體中單個(gè)神經(jīng)元之間的網(wǎng)絡(luò)活動(dòng)和連接可視化。團(tuán)隊(duì)檢測(cè)到了鈣離子活動(dòng)的動(dòng)態(tài)變化，并發(fā)現(xiàn)了能夠自行組織成簇并與附近其他簇形成網(wǎng)絡(luò)的細(xì)胞之間的綜合活動(dòng)。同步神經(jīng)活動(dòng)的表現(xiàn)，可以作為各種相關(guān)大腦功能的基礎(chǔ)，包括記憶。研究發(fā)現(xiàn)的另一個(gè)重點(diǎn)是體外生長(zhǎng)的神經(jīng)元會(huì)自發(fā)激發(fā)，這是神經(jīng)元在人腦中生長(zhǎng)和建立新連接的方式之一。

繞不開(kāi)的倫理問(wèn)題

學(xué)界就意識(shí)問(wèn)題各持己見(jiàn)，但科學(xué)家們也共同認(rèn)識(shí)到，創(chuàng)建意識(shí)系統(tǒng)要比定義容易得多。因此，腦類(lèi)器官研究也正凸顯了一個(gè)盲點(diǎn)：科學(xué)家沒(méi)有商定一致的方法來(lái)定義和測(cè)量意識(shí)。

就連Muotri本人也承認(rèn)，他不知道使用哪種定義來(lái)判定一個(gè)類(lèi)器官是否達(dá)到意識(shí)狀態(tài)。于是，對(duì)于腦類(lèi)器官是否產(chǎn)生意識(shí)，也成為了科研人員個(gè)人的理論偏好，會(huì)影響個(gè)人的研究方法和目的。

所以，未雨綢繆。Anil Set提出在尚沒(méi)有任何明確方法來(lái)評(píng)估類(lèi)器官意識(shí)狀態(tài)之時(shí)，必須先發(fā)制人確定倫理框架。美國(guó)埃默里大學(xué)的神經(jīng)倫理學(xué)項(xiàng)目主任Karen Rommelfanger也贊同，認(rèn)為腦類(lèi)器官與其他身體類(lèi)器官研究的差異不僅涉及生物學(xué)方面，而且還包括倫理方面。意大利帕維亞大學(xué)的Andrea Lavazza認(rèn)為，在未來(lái)，類(lèi)器官可能會(huì)表現(xiàn)出體驗(yàn)疼痛等基本感覺(jué)的能力，從而表現(xiàn)出感知能力，甚至是基本的意識(shí)形式。這要求我們考慮是否應(yīng)該賦予腦類(lèi)器官道德地位，以及應(yīng)該引入哪些限制來(lái)規(guī)范研究[31]。

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