Oocyte被“激活”了嗎？

卵胞漿內單精子注射（ICSI）借助顯微注射系統(tǒng)直接將精子注射到卵泡漿內，繞過了常規(guī)IVF精子與透明帶的結合、頂體反應、精子與卵細胞膜的融合等來實現(xiàn)受精的過程。在臨床實際應用中，選擇ICSI受精能提高受精率和降低異常受精率。然而臨床統(tǒng)計分析表明仍有1%～3%的ICSI周期會發(fā)生受精率低下或者完全受精失敗。ICSI受精失敗的原因有很多方面，其主要原因在于卵母細胞激活不足，而導致卵母細胞激活失敗的首要原因在于精子缺陷和遺傳學因素等。

如何避免患者ICSI后卵母細胞激活失敗，從而得到更多的受精卵和優(yōu)質胚胎，最終獲得妊娠并出生健康嬰兒，最大可能減輕其精神心理和經濟負擔仍是目前ART面臨的挑戰(zhàn)。卵子人工輔助激活（assist oocyte activation, AOA)即通過人工誘導模擬精子引發(fā)的鈣離子震蕩，可以有效彌補精卵結合時的卵子激活缺陷，誘導減數(shù)分裂正常進行、雌雄原核的形成，幫助卵子啟動胚胎發(fā)育，從而完成受精。對于ICSI受精失敗患者通?？梢越柚鶤OA有效地克服因卵母細胞激活不足引起的受精失敗或受精率低，并能獲得正常發(fā)育的胚胎。

在人類輔助生殖治療中使用了多種人工激活方法，包括機械、物理或化學刺激，它們會引起卵母細胞細胞質中的一種或多種鈣升高，卵母細胞胞質中游離鈣的升高是受精過程中啟動卵子激活的一個重要因素。

人體內的機械 AOA 可以通過在 ICSI 程序中破壞質膜并進行的細胞質抽吸來實現(xiàn)。對卵母細胞細胞質的大力抽吸可能會增加注射時卵母細胞的鈣負荷，可以使注射的精子頭部與卵母細胞的細胞內鈣儲存建立更緊密的接觸，從而導致更高的受精率。有臨床中心數(shù)據(jù)顯示，ICSI過程中反復抽吸卵母細胞細胞質可以提高卵母細胞的受精率，然而不提高胚胎可用率。ICSI過程反復抽吸，可能會對卵母細胞造成損傷，引起凋亡。因此在ICSI過程中要注意抽吸的力度，以免損傷卵母細胞。

最流行的物理刺激 AOA 是電激活，它通過在質膜中形成孔來誘導鈣流入。直流電壓產生的電場使細胞膜脂雙層中的帶電蛋白質移動，從而在膜中形成孔。培養(yǎng)基中的細胞外鈣通過這些孔流入卵母細胞，瞬時升高內部鈣濃度并激活卵母細胞。電刺激中的電脈沖受脈沖強度、寬度、時間等因素的影響，如果脈沖時程過長或場強過高，則導致卵母細胞退化、死亡增多。電激活需要電融合儀，因此在臨床上的應用較少，主要用于獲得孤雌生殖哺乳動物胚胎，也是體細胞核移植后的關鍵步驟之一，可作為研究早期胚胎發(fā)生過程中生化和形態(tài)學事件的模型。

化學刺激AOA在人類輔助生殖中最為常用的卵子人工激活方式，其激活劑主要包括鈣離子載體A23187，離子霉素、氯化鍶及氯化鈣等。離子載體是一種脂溶性分子，可將離子轉運穿過細胞膜的脂雙層，從而使細胞外鈣流入細胞。鈣離子載體通過增加細胞膜的鈣滲透性來幫助激活卵母細胞。鈣離子載體A23187的AOA不僅提高ICSI受精失敗或受精低下患者的受精率，還可以提高胚胎的卵裂率和優(yōu)質胚胎率。

AOA 的目標是盡可能地模擬哺乳動物受精過程中看到的生理鈣變化，因此AOA 是一種高度專業(yè)化的受精技術，當傳統(tǒng)的 ICSI 無法激活人類卵母細胞時，可能會應用它。卵母細胞激活是人類發(fā)育的最早事件，在這個生命的關鍵階段，任何輕微或重大的不良事件都可能對單個器官和/或整個人體的功能產生長期或持久的影響。有兩項研究隨訪分析了AOA后出生的共43名兒童，結果表明AOA 出生的兒童在產科、新生兒、神經發(fā)育和行為結果上沒有嚴重的不良反應。以上研究的規(guī)模太小，不能提供足夠的關于AOA安全性的科學證據(jù)，因此， AOA 仍不應被視為 ICSI 受精失敗的常規(guī)治療。此外，ICSI-AOA 并非對所有疑似卵母細胞激活缺陷的患者都有益，因此在向一對夫婦建議 AOA 之前，應考慮受精史。