惰性？活性？——抗凝血涂層阻止血栓形成的原理……

惰性抗凝涂層（如磷酰膽堿類）主要通過(guò)降低材料表面的血漿蛋白質(zhì)吸附和血細(xì)胞粘附，從而抑制凝血系統(tǒng)的激活。因此，體外通常采用蛋白質(zhì)吸附測(cè)試和血小板粘附測(cè)試來(lái)初步評(píng)價(jià)惰性涂層的抗凝性能。蛋白質(zhì)吸附測(cè)試通常選擇凝血系統(tǒng)關(guān)鍵蛋白質(zhì)——纖維蛋白原，測(cè)試方法包括同位素標(biāo)記法、熒光標(biāo)記法、洗脫液濃度測(cè)定法（如BCA法）等。血小板粘附測(cè)試可以在全血或富血小板血漿（PRP）中進(jìn)行，之后通過(guò)掃描電子顯微鏡（SEM）觀察形態(tài)和統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)，或通過(guò)血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)。

活性抗凝涂層中應(yīng)用最為廣泛的是肝素涂層，肝素通過(guò)結(jié)合并激活血液中的抗凝血酶III（ATIII）從而抑制凝血酶和Xa等凝血因子活性，進(jìn)而阻斷凝血反應(yīng)。凝血因子活性抑制的直接表現(xiàn)就是凝血時(shí)間的延長(zhǎng)，因此，體外初步評(píng)價(jià)肝素涂層抗凝性能的最常用方法是測(cè)定部分凝血酶激活時(shí)間（PTT），也可以直接測(cè)定ATIII活性。此外，由于肝素能夠被甲苯胺藍(lán)溶液著色，因此可以通過(guò)該方法實(shí)現(xiàn)涂層完整性、均勻性以及肝素密度的測(cè)試。

當(dāng)然，無(wú)論是哪一種策略，都是為了最終減少產(chǎn)品表面血栓的產(chǎn)生，因此，更直觀且通用的方式則是直接在全血接觸后觀察產(chǎn)品表面形成的血栓量，但該方式不易定量，且具有一定偶然性。在設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)階段合理選擇抗凝涂層的體外性能評(píng)價(jià)方法，有助于高效評(píng)估技術(shù)路線的可行性，也為產(chǎn)品的注冊(cè)提供更豐富的科學(xué)支撐數(shù)據(jù)。