[科普中國(guó)]-細(xì)胞色素C

還原型為分散的針狀結(jié)晶，氧化型系花瓣?duì)罱Y(jié)晶，二者均易溶于水及酸性溶液，前者水溶液呈桃紅色，后者呈深紅色。對(duì)熱都較穩(wěn)定。而前者較后者更穩(wěn)定些，分子量約11000-13000。臨床上用于各種組織缺氧急救的輔助治療，如一氧化碳中毒、催眠藥中毒、氰化物中毒、新生兒窒息、嚴(yán)重休克期缺氧、腦血管意外、腦震蕩后遺癥、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困難和各種心臟疾患引起的心肌缺氧的治療。

化合物簡(jiǎn)介概況本品為生物氧化過程中的電子傳遞體。其作用原理為在酶存在的情況下，對(duì)組織的氧化、還原有迅速的促酶作用。通常外源性細(xì)胞色素C不能進(jìn)入健康細(xì)胞，但在缺氧時(shí)，細(xì)胞膜的通透性增加，細(xì)胞色素C便有可能進(jìn)入細(xì)胞及線粒體內(nèi)，增強(qiáng)細(xì)胞氧化，能提高氧的利用。

來自三羧酸循環(huán)中產(chǎn)生的琥珀酸輔酶A，其肽鏈僅有104個(gè)氨基酸，體內(nèi)大量存在，一般無需外源補(bǔ)充；且外源補(bǔ)充與體內(nèi)含量相比甚微。細(xì)胞色素C是生物氧化的一個(gè)非常重要的電子傳遞體，在線粒體嵴上與其它氧化酶排列成呼吸鏈，參與細(xì)胞呼吸過程。

基本信息中文名稱：細(xì)胞色素C

中文別名：肌高鐵血紅素;細(xì)胞色素丙;細(xì)胞血素C;

英文名稱：Cytochrome C

英文別名：Cytomac P;Cytochromert;myohematin;cytorest;Cytor-est;CYT-C;Cytochrome C (horse heart); Cytochrome c from horse heart; cytochrome C from pigeon breast muscle; cytochrome C from chicken heart; cytochrome C from porcine heart; cytochrome C from tuna heart; cytochrome C from bovine heart; cytochrome C from sheep heart; cytochrome C from saccharomyces*cerevisiae; cytochrome C practical grade: from*bovine heart; cytochrome C from dog heart; cytochrome C peptide map control; cytochrome C from rat heart; cytochrome C from rabbit heart; cytochrome C from bison heart; Cytochrome c, Equine Heart; Cytochrome (bovine heart); Cytochrome鎐 equine heart; Cytochrome鎐 from pigeon breast muscle; CYTOCHROME-C

CAS號(hào)：9007-43-6

EINECS 232-700-9

分子式：C42H52FeN8O6S2

結(jié)構(gòu)式：

分子量：884.88700

精確質(zhì)量：884.28000

PSA：286.03000

LogP：3.85300

物化性質(zhì)外觀與性狀：棕色-紅色結(jié)晶粉末

熔點(diǎn)：300oC

沸點(diǎn)：1323.5oC at 760 mmHg

閃點(diǎn)：754.2oC

穩(wěn)定性：Oxidizes when exposed to air.

儲(chǔ)存條件：-20oC

安全信息海關(guān)編碼：3507909000

WGK Germany：3

安全說明：S24/25

RTECS號(hào)：HA5365000

危險(xiǎn)品標(biāo)志：Xi; Xn2

合成方法1.將新鮮或冷凍豬心，洗凈，去血塊、脂肪和肌腱等，切條，用絞肉機(jī)絞碎。然后加入1.5倍的水，用1mol/L的硫酸調(diào)節(jié)pH值為4左右，常溫下攪拌，浸提2h，壓濾。濾液用1mol/L的氨水中和至pH=6.2，離心分離取清液。殘?jiān)儆玫攘克貜?fù)提取一次，合并兩次提取液。提取液用2mol/L氨水調(diào)pH值為7.5，靜止沉淀雜蛋白，離心，吸取上層清液。然后按每升提取液加入10g沸石，在不斷攪拌下充分吸附40min，靜置，棄去上層清液。用蒸餾水洗滌吸附有細(xì)胞色素C的沸石3次，用0.2%的氯化鈉洗滌4次，再用蒸餾水洗至洗滌液澄清。過濾沸石，抽干，裝入色譜柱中，并用25%的硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加入固體硫酸銨使?jié)舛冗_(dá)45%，雜蛋白完全析出，過濾。濾液中緩慢加入三氯乙酸（20%）溶液，邊加邊攪拌，待細(xì)胞色素C沉淀完全析出后，離心收集沉淀。將沉淀溶于蒸餾水，用水透析至無硫酸根離子。將透析后溶液通過已處理好的Amberlite IRC50（NH+4）樹脂柱吸附，用水洗滌至澄清，再用磷酸氫二鈉（0.6mol/L)和氯化鈉(0.4mol/L)混合液洗脫，洗脫速要慢，一般流速為2ml/min。洗脫液再用蒸餾水透析至無氯離子為止，可得細(xì)胞色素C精品溶液。收率為100～150mg/kg，含量大于20mg/ml。

2.以新鮮酵母為原料的提取法

用途1.細(xì)胞呼吸激活藥。對(duì)組織中細(xì)胞的氧化、還原過程具有迅速的酶促作用。用于急救或輔助治療中因各種原因引起的組織缺氧。對(duì)抗癌藥物引起的白血球降低，四肢循環(huán)障礙，肝疾患，腎炎亦有一定的治療作用。

2.適用于治療由腦缺氧、心肌缺氧和其他組織缺氧引起的一系列癥狀。本品尚能促進(jìn)受損肝細(xì)胞再生、骨髓造血機(jī)能修復(fù)，顯著減輕由放療引起的白細(xì)胞減少癥。3

細(xì)胞色素C溶液藥典標(biāo)準(zhǔn)來源含量本品系自豬或牛心中提取的細(xì)胞色素C的水溶液。每1ml中含細(xì)胞色素C不得少于15mg。

制法要求本品應(yīng)從檢疫合格的豬或牛心中提取，生產(chǎn)過程應(yīng)符合現(xiàn)行版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。

性狀本品為深紅色的澄清液體。

鑒別（1）取含鐵量項(xiàng)下的供試品溶液1ml，滴加20%三氯醋酸溶液，即生成棕色或棕紅色的凝乳狀沉淀，溶液的紅色消失。沉淀能在水中溶解，溶液顯棕紅色。

（2）取含鐵量項(xiàng)下的供試品溶液1ml，置50ml量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鈉1.38g與磷酸氫二鈉31.2g，加水適量使溶解成1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.3）稀釋至刻度，加連二亞硫酸鈉約15mg，搖勻，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄ⅣA）測(cè)定，在520nm與550nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，在535nm的波長(zhǎng)處有最小吸收。

檢查含鐵量--標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備

取硫酸鐵銨50g，加水300ml與硫酸6ml的混合液溶解后，加水適量使成1000ml，搖勻。精密量取25ml，置碘瓶中，加鹽酸5ml，混合，加碘化鉀試液12ml，密塞，靜置10分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液1ml，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。每1ml硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于5.585mg的Fe。根據(jù)硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）消耗的量（ml），計(jì)算每1ml中含F(xiàn)e量（mg）。精密量取適量，加硫酸稀釋液（取稀硫酸2ml，用水稀釋至500ml）制成每1ml中含23μg的Fe。

供試品溶液的制備

精密量取本品適量（約相當(dāng)于細(xì)胞色素C 100mg），置10ml量瓶中，用水稀釋至刻度。

測(cè)定法

精密量取供試品溶液5ml，置已熾灼至恒重的坩堝中，蒸干，在105℃干燥至恒重，精密稱定重量W1，緩緩熾灼至完全炭化后，繼續(xù)在500～600℃熾灼使完全灰化并恒重，精密稱定重量W2。另精密量取供試品溶液1ml，置25ml量瓶中，加30%過氧化氫溶液0.7ml與稀硫酸0.5ml，置水浴中，加熱30分鐘，取出，放冷，精密加入聯(lián)吡啶試液2ml，置冷水浴中，緩緩加入亞硫酸鈉試液5ml，隨加隨振搖，置60～70℃水浴中，加熱30分鐘，取出，放冷至室溫，用水稀釋至刻度，搖勻，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ A），在522nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度A1，另精密量取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液2ml，置25ml量瓶中，照上述方法，自“加30%過氧化氫溶液0.7ml”起，依法操作，測(cè)定吸光度A2，按下式計(jì)算，含鐵量應(yīng)為0.40%～0.46%。

細(xì)菌內(nèi)毒素

取本品，依法檢查（2010年版藥典二部附錄ⅪE），每1mg細(xì)胞色素C中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于5.0EU。

過敏反應(yīng)

取本品適量，加注射用水稀釋成每1ml中含細(xì)胞色素C 7.5mg的溶液，作為供試品溶液，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅺ K），應(yīng)符合規(guī)定。

活力

照細(xì)胞色素C活力測(cè)定法（2010年版藥典二部附錄ⅫB）測(cè)定，不得低于95.0%。

含量測(cè)定精密量取含鐵量項(xiàng)下的供試品溶液1ml，置50ml量瓶中，用鑒別（2）項(xiàng)下的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，加連二亞硫酸鈉約15mg，搖勻，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ A），在約550nm的波長(zhǎng)處，以間隔0.5nm找出最大吸收波長(zhǎng)，測(cè)定吸光度，按細(xì)胞色素C的吸收系數(shù)（E）為23.0計(jì)算，即得。

制劑（1）細(xì)胞色素C注射液 （2）注射用細(xì)胞色素C4

藥物分析方法名稱：細(xì)胞色素C注射液—細(xì)胞色素C的測(cè)定—分光光度法

應(yīng)用范圍：本方法采用分光光度法測(cè)定細(xì)胞色素C注射液中細(xì)胞色素C的含量。

本方法適用于細(xì)胞色素C注射液。

方法原理：取本品適量，加磷酸鹽緩沖液溶解并定容，再加連二亞硫酸鈉，用紫外-可見分光光度法測(cè)定吸光度，按細(xì)胞色素C的吸收系數(shù)（E1m）為23.0計(jì)算，即得。

試劑：1.連二亞硫酸鈉

2.磷酸鹽緩沖液

儀器設(shè)備：可見分光光度計(jì)

試樣制備：供試品溶液的制備

精密量取本品1mL，作為即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一?！熬芰咳　毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。5

藥理作用細(xì)胞色素C系從豬或牛心中提取而得，為生物氧化過程中的電子傳遞體。作用與輔酶相似。當(dāng)組織缺氧時(shí)，細(xì)胞通透性增高，注射用藥后，細(xì)胞色素C可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)起到矯正細(xì)胞呼吸與促進(jìn)物質(zhì)代謝的作用。

本品為細(xì)胞呼吸激活酶，作為組織缺氧治療的急救用藥和輔助藥物,如一氧化碳中毒，安眠藥中毒，初生兒假死，不可逆休克期缺氧，麻醉前的處理；肺炎，肺癌，硅肺，肺氣腫，支氣管擴(kuò)張所引起的呼吸困難，高山病缺氧，腦血管障礙，腦外傷，腦出血，腦動(dòng)脈硬化癥，腦震蕩后遺癥,乙型腦炎后遺癥，百日咳腦病等等引起的腦缺氧；中毒性心肌損害,心肌炎,心肌代償不全,心絞痛，白喉性心肌炎，心肌梗塞等;對(duì)抗癌藥物所引起的白血球的降低，四肢循環(huán)障礙，神經(jīng)麻痹癥,肝病,腎炎也有改善作用。6

誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡

有關(guān)細(xì)胞凋亡的研究表明，細(xì)胞色素C與細(xì)胞凋亡有關(guān)，從線粒體中泄露出的細(xì)胞色素C有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。

藥代動(dòng)力學(xué)細(xì)胞色素C注射后，大部分被缺氧組織利用。少部分分布于心臟組織中，逐漸經(jīng)肝、腎還原，由尿排出。6

適應(yīng)癥細(xì)胞色素C為細(xì)胞呼吸激活藥，用于各種組織缺氧的急救或輔助治療，如一氧化碳中毒、中樞抑制藥（催眠藥）中毒、新生兒窒息、嚴(yán)重休克期缺氧、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困難、高山缺氧、腦缺氧及心臟疾病引起的缺氧等，但療效有時(shí)不顯著。在國(guó)外，細(xì)胞色素C是某些治療白內(nèi)障的眼藥的成分，但其作用不清楚。6

禁忌證1.對(duì)細(xì)胞色素C過敏者。

2.用藥前應(yīng)作過敏試驗(yàn)，陽性反應(yīng)者禁用。6

用量用法1. 肌注：成人每次15mg，每日1次，病重者每次30mg，每日2次，更嚴(yán)重者可酌情增加。兒童用量酌減。

2. 靜注：每次15～30mg，每日1～2次，加25%葡萄糖液20ml混勻后，緩慢注射；亦可用5%～10%葡萄糖液或等滲鹽水等稀釋后靜滴。

3. 粉針（凍干型）目前用25%葡萄糖液20ml或5%葡萄糖液或滅菌等滲鹽水溶解后滴注。6

注意事項(xiàng)1.可引起過敏反應(yīng)，用藥前需作過敏試驗(yàn)。

2.當(dāng)停用后再用時(shí)，應(yīng)再作過敏試驗(yàn)，陽性者禁用。

3.治療中若一經(jīng)停藥，再用藥時(shí)易發(fā)生休克，如發(fā)生休克，用升壓藥，強(qiáng)心藥，抗組織胺藥，腎上腺皮質(zhì)素處理.

4.對(duì)缺氧治療應(yīng)采取綜合措施。6

不良反應(yīng)1.可引起過敏反應(yīng)，用前需作過敏試驗(yàn)。

2.有局部痙攣、皮疹、發(fā)熱、口渴及暫時(shí)性休克等反應(yīng)。6

專家點(diǎn)評(píng)細(xì)胞色素C用于各種組織缺氧的急救或輔助治療，如一氧化化碳及催眠藥中毒，新生兒窒息、腦外傷等各種原因引起的腦缺氧等。對(duì)抗癌藥物引起的白細(xì)胞降低，四肢循環(huán)障礙，肝臟疾患和腎炎亦有一定改善作用。6

細(xì)胞色素細(xì)胞色素種類較多，可以用光譜學(xué)、血紅素基團(tuán)的精確結(jié)構(gòu)、抑制劑的敏感度以及還原電勢(shì)的大小來分辨。

根據(jù)輔基的不同，可以將細(xì)胞色素大致分為三類：

分類輔基

細(xì)胞色素a 血紅素a（原血紅素）

細(xì)胞色素b血紅素b（甲酰血紅素）

細(xì)胞色素d 二氫卟酚（Chlorin）的衍生物[1]

細(xì)胞色素c不是根據(jù)輔基來命名；與其他三類細(xì)胞色素非共價(jià)結(jié)合血紅素不同的是，細(xì)胞色素c通過分子中的半胱氨酸巰基與血紅素共價(jià)結(jié)合。[2]細(xì)胞色素e尚無，但有細(xì)胞色素f（細(xì)胞色素c中的一種）。[3]此外，細(xì)胞色素d僅存在于細(xì)菌中。

在線粒體和葉綠體中，細(xì)胞色素常常結(jié)合在電子傳遞和相關(guān)代謝途徑的復(fù)合物酶中。

關(guān)系判斷親緣關(guān)系越近的生物，其細(xì)胞色素C越相似或相同。比如人和黑猩猩。而如果在進(jìn)化史上相去甚遠(yuǎn)，則其細(xì)胞色素C也相差越遠(yuǎn)，比如人和酵母菌。

鑒于細(xì)胞色素C分子在呼吸電子傳遞鏈中不可或缺的地位，其分子結(jié)構(gòu)是相對(duì)保守的。但隨著生物的進(jìn)化，其分子組成結(jié)構(gòu)也必將出現(xiàn)變異，只是相對(duì)于其他蛋白來說，細(xì)胞色素C分子的很多變異可能導(dǎo)致生物體的電子傳遞出現(xiàn)問題而導(dǎo)致死亡，因此，其分子進(jìn)化要緩慢而保守。