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[科普中國]-褐藻寡糖

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褐藻寡糖

英文名稱:Alginate oligosaccharides

采用不同的降解方法(酸降解法,酶降解法,氧化降解法)降解褐藻膠,可以得到聚合度20以下的系列褐藻膠寡糖。是由β-D-聚甘露糖醛酸(M)和α-L-聚古羅糖醛酸(G)組成的線型低聚合物,有聚甘露糖醛酸(PM)、聚古羅糖醛酸(PG)和雜合褐藻寡糖(PMG)三種類型產(chǎn)品。

特性

褐藻膠寡糖為淡黃褐色粉末,能溶于水,穩(wěn)定性強。褐藻膠寡糖具有多項生物學功能,在醫(yī)藥、食品、日化、飼料和農(nóng)業(yè)方面有廣泛的應用。1

化學屬性一種來自褐藻的低聚糖。低聚糖又稱寡糖(英文對照:oligosaccharide;oligosaccharides; oligose),褐藻低聚糖的獲得大體上可分為β-D-聚甘露糖醛酸(M)和α-L-聚古羅糖醛酸(G)組成的線型低聚合物,有聚甘露糖醛酸(PM)、聚古羅糖醛酸(PG)和雜合褐藻寡糖(PMG)。1

生物學功能降血糖合適劑量的褐藻膠寡糖能較好地防止高膽固醇血癥的形成,有降脂、維護心血管正常功能的作用。

抗自由基氧化褐藻膠寡糖不僅具有清除活性氧的作用,還能夠顯著降低脂質(zhì)過氧化物的含量,提高過氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性,具有清除過多自由基與抗脂質(zhì)過氧化的作用。2

抗炎癥褐藻膠寡糖來源豐富,理論上是sLex 、sLea和肝素寡糖的良好抗炎替代品、具有良好的潛在藥用價值。2

免疫調(diào)節(jié)活性褐藻膠寡糖能刺激各種免疫活性細胞(如巨噬細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞等)的分化、成熟、繁殖,使機體的免疫系統(tǒng)得到恢復和加強,并能通過免疫調(diào)節(jié)作用發(fā)揮多種生理活性。2

生長調(diào)節(jié)作用褐藻膠寡糖在植物體內(nèi)也是重要的信號分子,可促進植物的生長,而且可提高植物對病蟲害的抵抗力。1

應用領域醫(yī)藥領域褐藻膠寡糖具有多種生物學功能,依照它的藥用功能,褐藻寡糖藥物的開發(fā)也會越來越多。

如抗心血管藥物;海藻酸丙二酯硫酸酯鈉鹽降脂抗栓藥物;甘糖脂抗病毒藥物;聚甘古酯抗尿路結(jié)石藥物;古糖脂。2

食品領域作為食品材料或添加劑應用于食品工業(yè)中。褐藻膠寡糖具有整腸和解毒、降血糖血脂、抗凝血、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用,可作為糖尿病、肥胖癥、直腸結(jié)腸癌、習慣性便秘患者的療效食品。還可以添加到調(diào)味品、奶制品、果汁中,既豐富了產(chǎn)品的口味,又增加了營養(yǎng)還有排除重金屬離子,降血糖活性的功效。褐藻寡糖以其生物功能多樣性,在日用化工領域有廣泛的應用方向。

飼料領域褐藻寡糖克服了以往所有抗生素、益生素、酶制劑等的不足,用量少,純天然,無殘留且穩(wěn)定性強,并能提高動物機體的抗病能力,促進動物生長,增加動物營養(yǎng),是優(yōu)良的飼料添加劑。

畜牧飼料添加劑:豬、牛、雞等 水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料添加劑:海參、鮑魚、對蝦等 農(nóng)業(yè)領域褐藻寡糖可激發(fā)植物免疫系統(tǒng)、提高抗病能力、促進細胞活化,刺激植物生長。2

褐藻多糖的分離及純化褐藻膠及巖藻多糖分離提取褐藻多糖粗提:褐藻膠在褐藻中主要以不溶于水的褐藻酸鈣形式存在,而巖藻多糖則為水溶性硫酸酯多糖。根據(jù)這一性質(zhì)本實驗先以水提方法從海帶中提取巖藻多糖(含褐藻淀粉),然后以1%的NaCO3使褐藻膠生成水溶性的褐藻酸鈉,進行水提。由于褐藻酸鹽不溶于稀鹽酸,可用鹽酸調(diào)pH至酸性,沉淀收集褐藻膠。巖藻多糖與褐藻淀粉在乙醇中溶解度存在差異,以不同濃度的乙醇將二者沉淀分離。

褐藻多糖純化:巖藻多糖粗品含較多的水溶性蛋白,60℃蒸餾水溶解,用2%三氯乙酸使水溶性蛋白變性5000r/min離心30min.收集上清液,以70%乙醇沉析,收集沉淀,蒸餾水溶解,透析48h甲1%乙醇鈉,以70%乙醇沉析,收集沉淀,沉淀用蒸餾水溶解,過DEAE-纖維素離子交換拄層析,0.5~1.0mol/LNaCI梯度洗脫。褐藻酸鈉粗品中不含蛋白,只需水溶,蒸餾水透折48h,過DEAE-纖維素離子交換拄層析,0.5~1.0mol/LNaCl梯度洗脫。兩種多糖DEAE-纖維素離子交挨拄層析。上樣體積為10ml,每十分鐘收集一管,每管5ml。洗脫液測定總糖含量。收集洗脫液經(jīng)蒸發(fā)濃縮,透析脫鹽,減壓干燥,得到純的多糖晶體。

總糖測定方法苯酚試劑配制80%苯酚:80g苯酚(分析純重蒸餾試劑)加20g水使之溶解,可在冰箱中避光長期貯存。6%苯酚:使用前用80%苯酚配制。

標準曲線的制作:準確稱取葡萄糖20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8mI,各以蒸餾水補至2.0ml,然后加入6%的苯酚1.0ml,濃硫酸5ml,沸水浴煮15min,冷卻后搖勻,室溫靜置20min,490nm測光吸收值。以2.0ml蒸餾水為空白,橫坐標為多糖濃度,縱坐標為光吸收值,得標準曲線。

樣品含量測定:吸取樣品液1.0 ml,按上述步驟操作,以標準曲線計算多糖含量。

脫鹽:透析法脫鹽,使用分子量12000透析袋,每袋5ml,蒸餾水攪拌透析過夜,24h換一次蒸餾水,測定透析液電導率以確定脫鹽效果。

pH測定:配制2ug/ml-1多糖溶液測定pH。

電導率測定:多糖溶液濃度為2ug/ml-1以蒸餾水為空白測電導率。34