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[科普中國(guó)]-食品級(jí)載體

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必備條件

①在宿主細(xì)胞中能保存下來并能大量復(fù)制,且對(duì)受體細(xì)胞無害,不影響受體細(xì)胞正常的生命活動(dòng)。

②有多個(gè)限制酶切點(diǎn),而且每種酶的切點(diǎn)最好只有一個(gè),如大腸桿菌pBR322就有多種限制酶的單一識(shí)別位點(diǎn),可適于多種限制酶切割的DNA插入。

③含有復(fù)制起始位點(diǎn),能夠獨(dú)立復(fù)制;通過復(fù)制進(jìn)行基因擴(kuò)增,否則可能會(huì)使重組DNA丟失。

④有一定的標(biāo)記基因,便于進(jìn)行篩選。如大腸桿菌的pBR322質(zhì)粒攜帶氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因,就可以作為篩選的標(biāo)記基因。一般來說,天然運(yùn)載體往往不能滿足上述要求,因此需要根據(jù)不同的目的和需要,對(duì)運(yùn)載體進(jìn)行人工改建。現(xiàn)在所使用的質(zhì)粒載體幾乎都是經(jīng)過改建的。

⑤載體DNA分子大小應(yīng)合適,以便操作。

食品級(jí)載體的選擇標(biāo)記根據(jù)采用的選擇方法 ,目前用于食品級(jí)載體的選擇標(biāo)記主要有細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)缺陷性互補(bǔ)標(biāo)記、糖類利用標(biāo)記、細(xì)菌素抗性/免疫性標(biāo)記 、金屬離子抗性標(biāo)記、熱應(yīng)激抗性標(biāo)記、噬菌體抗性標(biāo)記。

應(yīng)用意義及發(fā)展前景通過食品級(jí)載體把有益于人和動(dòng)物的外源基因,如某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(必需氨基酸、維生素等)、保健和治病藥物( 如抗癌藥物 、防衰老藥物、各種免疫源和有關(guān)的藥物蛋白)、生長(zhǎng)發(fā)育的激素( 如促乳素、生長(zhǎng)素等)等基因?qū)胍嫔? 然后制成活菌制劑 ,引入人體和動(dòng)物體內(nèi)( 定植或短暫定植), 產(chǎn)生機(jī)體所需的外源基因的產(chǎn)物。這種重組基因工程菌, 集菌體本身和有益基因于一體,且省去了一般基因工程菌需要的繁瑣的提取工藝 ,為基因工程生產(chǎn)安全、廉價(jià)的生物制品開辟了新途徑,這對(duì)于今后發(fā)酵食品工業(yè)將是一次全新的革命。因此 ,今后應(yīng)更多地研究不易突變、選擇方便、可操作性強(qiáng)的食品級(jí)選擇標(biāo)記 ,為乳酸菌、芽孢桿菌等食品級(jí)微生物在功能食品、醫(yī)療保健、微生態(tài)制劑、化妝品及人工口服疫苗等領(lǐng)域的應(yīng)用提供基礎(chǔ)。1