[科普中國(guó)]-農(nóng)藥免疫分析技術(shù)

農(nóng)藥殘留的免疫分析方法是在已有免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的，因此它的免疫學(xué)反應(yīng)原理及操作過(guò)程都與其他免疫檢測(cè)方法相類(lèi)似。用于農(nóng)藥殘留免疫分析反應(yīng)的類(lèi)型絕大多數(shù)是抗體或抗原競(jìng)爭(zhēng)型反應(yīng)。

免疫分析法免疫分析法(InununoassayIA)是一種抗體作為生物化學(xué)檢測(cè)器對(duì)化合物、酶或蛋白質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的分析技術(shù)。20世紀(jì)90年代以來(lái)它在檢測(cè)糧食、水果、蔬菜、肉、奶、水和土壤中農(nóng)藥的殘留分析上得到迅速發(fā)展，成為優(yōu)先研究、開(kāi)發(fā)和應(yīng)用的一項(xiàng)分析技術(shù)。

免疫分析法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高(檢測(cè)極限可達(dá)1～1000ng/ml)、方便快捷、分析容量大、檢測(cè)成本低、安全可靠等優(yōu)點(diǎn)。一般不需要貴重儀器，可大大簡(jiǎn)化甚至省去前處理過(guò)程，對(duì)使用人員的專(zhuān)門(mén)技術(shù)要求不高，容易普及和推廣。該技術(shù)開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品—檢測(cè)試劑盒，可廣泛應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)樣品和大量樣品的快速檢測(cè)。

因此，人們稱(chēng)免疫分析技術(shù)是21世紀(jì)最具競(jìng)爭(zhēng)性和挑戰(zhàn)性的檢測(cè)分析技術(shù)。

免疫分析標(biāo)記抗體的類(lèi)型農(nóng)藥殘留的免疫分析方法是在已有免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的，因此它的免疫學(xué)反應(yīng)原理及操作過(guò)程都與其他免疫檢測(cè)方法相類(lèi)似。用于農(nóng)藥殘留免疫分析上的抗體標(biāo)記方法主要有4種類(lèi)型，即放射性標(biāo)記、酶標(biāo)記、生物素標(biāo)記和熒光抗體標(biāo)記。早期的農(nóng)藥殘留免疫分析標(biāo)記抗體主要是以碘標(biāo)記為主，但由于這種標(biāo)記方法半衰期短，而且對(duì)環(huán)境和人有潛在的危險(xiǎn)性，因而逐步被酶標(biāo)記所替代，由此建立的方法稱(chēng)為酶免疫分析法(EIA)：酶標(biāo)記的抗體保存期長(zhǎng)，具高敏感性，顯示結(jié)果直觀并可進(jìn)行光譜分析，這為農(nóng)藥殘留定性、定量分析帶來(lái)很大的方便。標(biāo)記在抗體上的酶主要是辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶和S-半乳糖苷酶在檢測(cè)過(guò)程中，當(dāng)加人適當(dāng)?shù)牡孜飼r(shí)產(chǎn)生特殊的顏色反應(yīng)，用于檢測(cè)此外，生物素標(biāo)記和熒光抗體標(biāo)記檢測(cè)農(nóng)藥殘留的應(yīng)用也有不少報(bào)道1。

農(nóng)藥殘留免疫分析檢測(cè)方法用于農(nóng)藥殘留免疫分析反應(yīng)的類(lèi)型絕大多數(shù)是抗體或抗原競(jìng)爭(zhēng)型反應(yīng)，其檢測(cè)方法有兩種：一種是抗原捕獲法，將已知量的標(biāo)記抗原與含有未知量的待測(cè)抗原混合在一起，然后將該混合液與吸附在固相上的亞飽和量抗體孵育，檢測(cè)液中含量高的抗原將減少標(biāo)記抗原的結(jié)合，這樣通過(guò)已知標(biāo)準(zhǔn)曲線定量出不同目標(biāo)檢測(cè)物的濃度；另一種是“三明治”分析法，是先把抗原吸附在固相上，然后將混有待測(cè)抗原的一抗抗體混合液與吸附在固相上的抗原孵育，沖洗掉已結(jié)合的抗體，再加人酶標(biāo)記的二抗抗體與其共同孵育，最后測(cè)定標(biāo)記抗體上酶催化底物產(chǎn)生的光吸收值的大小來(lái)確定農(nóng)藥殘留的量，也可將一抗抗體直接用酶標(biāo)記，然后測(cè)定結(jié)臺(tái)抗體上的酶所催化底物產(chǎn)生的顏色反應(yīng)。酶標(biāo)記反應(yīng)的固相支持物有聚苯乙烯、塑料管、膜和微球。目前大多數(shù)采用96孔酶標(biāo)板(MTP)作為固相支持物，這種板的檢測(cè)容量大，樣本數(shù)量多，其檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果只需有酶標(biāo)儀的配合就可得出準(zhǔn)確的檢測(cè)數(shù)據(jù)，與其他檢測(cè)手段相比，此種方法更易被使用者接受2。

本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:

梁志宏 - 副教授 - 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)